Semaglutidové nečistoty

Semaglutidové nečistoty|Kontrola nečistot simeglutidu|Vlastní syntéza nečistot a potvrzení struktury|Vědecký-peptid

Kontrola nečistot Soma Lutide (Simeglutide) - pro GLP-1 studie kvality léčiva, předložení generického léčiva. Věda-Peptide poskytuje vlastní syntézu nečistot souvisejících se Soma Lutide, včetně chybějících peptidů, oxidovaných nečistot, produktů exfoliace mastných kyselin, PEG-řetězců, spolu s potvrzením strukturních dat atd. Můžeme podpořit váš výzkum profilu nečistot. Vítejte, kontaktujte nás.

Semaglutid (také známý jako semaglutid) byl v těchto letech v plamenech. Novo Nordisk spoléhá na to, že posune tržní hodnotu k druhému světovému, domácímu výrobci peptidových generik, téměř nikdo na to nezírá. Orální léková forma a injekční léková forma jsou velké trhy. Kdo může po vypršení patentu jako první udělat kvalitní výzkum, kdo bude mít možnost chytit první generikum.

 

Kvalitní studie somatostatinu je však, upřímně řečeno, obtížnější než u mnoha peptidů. Je to 31-peptid s řetězcem mastné kyseliny (oktadekandiová kyselina) a PEG linkerem. Tato struktura určuje, že jeho spektrum nečistot je zvláště bohaté - chybějící peptidy, oxidované nečistoty, produkty uvolňování mastných kyselin, nečistoty související s PEG řetězcem, každý dimery musí mít kontrolu, každý musí být čirý. Zejména PEG řetězec, který se nenachází v běžných peptidech, je pro somalutid jedinečný.

 

Nashromáždili jsme mnoho zkušeností se syntézou komplexních peptidových nečistot. Specializujeme se na studium somatostatinu a víme, jaké jsou potíže v jeho profilu nečistot a jaké jsou základní kontrolní položky. Můžeme přizpůsobit syntézu různých kontrol Semaglutide Impurities podle vašich potřeb se strukturálními potvrzovacími údaji a pomůžeme vám stanovit metodu, takže je méně pravděpodobné, že vám bude vystaven dodatek při podání.

Molekulární struktura somatostatinu určuje, že jeho profil nečistot je mnohem složitější než profil běžných peptidů. Když provádíme studie nečistot, zaměřujeme se hlavně na tyto kategorie:

Chybějící peptid
31 aminokyselin, z nichž kterákoli během procesu syntézy chybí, je nečistota. Retenční časy chybějících peptidů na HPLC byly široce distribuovány, s různou polaritou chybějících peptidů v různých polohách. Některé chybí na N-konci, některé uprostřed a některé blízko místa připojení mastné kyseliny. Obdrželi jsme objednávku od zákazníka, který požadoval asi tucet chybějících peptidů na různých pozicích, aby bylo možné najít všechny možné chybějící nečistoty v jejich procesu.

Oxidující nečistoty
Somalutid má ve své sekvenci methionin (Met), který je náchylný k oxidaci na sulfoxid a poté na sulfon. Oxidované nečistoty se často objevují ve studiích stability a po určité době rostou. Provedli jsme srovnání, za zrychlených podmínek po dobu jednoho měsíce může oxidační vrchol bez kontroly narůst na více než 0,3 %.

Produkty odbourávání mastných kyselin
Postranní řetězec mastné kyseliny (oktadekandiová kyselina) somatostatinu je připojen k lysinu přes linker a tato modifikace může být částečně uvolněna během syntézy nebo skladování. Problematičtější je, že k uvolňování může docházet na různých místech - mezi mastnou kyselinou a linkerem a mezi linkerem a peptidem -, což vede k různým nečistotám. Pro naše zákazníky jsme syntetizovali několik nečistot souvisejících s mastnými kyselinami-, od úplného vyloučení až po malou část.

nečistoty související s PEG řetězcem-
Toto je nejspecifičtější typ nečistoty v somatostatinu. Má PEG (polyethylenglykol) linker a řetězec PEG se může během syntézy zlomit, zkrátit nebo polymerovat, což má za následek řadu souvisejících nečistot. Tyto nečistoty se nenacházejí v běžných peptidech, ale jsou jedinečné pro somatostatin a je obtížné je studovat ve studiích kvality. Vytvořili jsme různé varianty delece řetězce PEG, zkrácení řetězce PEG a oxidace řetězce PEG.

Dimery/polymery
Dvě nebo více molekul somatostatinu se shlukují a tvoří dimer nebo vyšší. Molekulová hmotnost dimeru je dvakrát větší než u hlavního píku a při HPLC je to často široký pík, takže musí být speciálně separován a čištěn, než může být použit jako kontrola. Provedli jsme přípravu dimerů a trvalo několik kol čištění, než bylo dosaženo čistoty více než 95 %.

Deamidované nečistoty
Asparagin (Asn) a glutamin (Gln) jsou snadno deamidovány za kyselých podmínek nebo zahřívání, což vede k izomerům. V sekvenci somatostatinu je několik Asn a Gln a deamidační nečistota se často objevuje v testu nucené degradace, takže k lokalizaci nečistoty je třeba použít kontrolní produkt.

Diastereoizomery
Během syntézy s dlouhým řetězcem mohou jednotlivé aminokyseliny podléhat racemizaci, což vede k diastereoizomerům. Obsah tohoto druhu nečistot nebývá vysoký, ale odborníci se při deklaraci zeptají a je lepší mít kontrolní přípravek pro potvrzení.

Mnohé z těchto nečistot nelze zakoupit a je třeba je syntetizovat na zakázku. Udělali jsme již mnoho projektů na přizpůsobení somatostatinových nečistot, pokrývajících všechny výše uvedené kategorie.

Delece peptidové řady
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95 %, s potvrzením MS a NMR. Syntetizovali jsme sadu peptidů s odstupem 5 aminokyselin od N-konce k C-konci.

Oxidující nečistoty
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95 % a můžeme poskytnout spektrum LC-MS pro potvrzení stupně oxidace. Sulfoxid a sulfon se oddělují pomocí HPLC a my můžeme udělat obojí.

Produkty odbourávání mastných kyselin
To je hlavní ohnisko somalutidových nečistot. Řetězec mastné kyseliny může být zcela nebo částečně uvolněn. Můžeme syntetizovat řadu variant pro různé polohy prolévání. V jednom z nejsložitějších projektů, které jsme kdy dělali, nás zákazník požádal, abychom syntetizovali nečistotu s chybějícími 6 uhlíky v řetězci mastných kyselin, a trvalo nám dva měsíce, než jsme to udělali správně.

nečistoty související s PEG řetězcem-
To je jedna z nejobtížnějších nečistot somatostatinu a je to také naše síla. PEG řetězec může chybět, může být zkrácený, přerušený, oxidovaný a mohou vznikat různé varianty. Udělali jsme nečistotu s úplně chybějícím PEG řetězcem (tj. de-PEGylovaný somatostatin), variantu s délkou řetězce PEG poloviční a produkt s PEG řetězcem oxidovaný. Zákazníkovi byly poskytnuty tyto kontroly a spektrum nečistot souvisejících s PEG- bylo plně stanoveno.

Dimer
Dimery vytvořené křížovým{0}}spojením nebo ne{1}}kovalentními interakcemi mohou být připraveny různými metodami a izolovány a purifikovány, aby poskytovaly kontroly vysoké čistoty. Čištění dimerů je pracné, ale máme zkušenosti, abychom věděli, jak monomery oddělit.

Deamidované nečistoty
Pro místa Asn a Gln v sekvenci můžeme připravit deamidované kontroly nečistot nucenou degradací nebo cílenou syntézou. Rozdíl v molekulové hmotnosti po deamidaci je pouze 1, což není snadné MS rozlišit, proto k potvrzení obvykle používáme NMR nebo speciální chromatografické podmínky.

Dther přizpůsobené nečistoty
Pokud ve svém výzkumu objevíte novou neznámou nečistotu, můžeme vám pomoci analyzovat strukturu a syntetizovat ji. Pošlete nám vzorek, my provedeme LC-MS analýzu, spekulujeme o struktuře, poté směrovou syntézu a poté porovnáme retenční čas a hmotnostní spektrum, abychom potvrdili shodu. Tento proces jsme provedli mnohokrát a úspěšnost je poměrně vysoká.

Vývoj a validace analytických metod
Při nastavování metody HPLC nebo LC{0}}MS je nutná kontrola nečistot pro lokalizaci, stanovení separace, ověření lineárního rozsahu a výtěžnost. Bez kontroly chybí validace metody. Mnoho zákazníků nás žádá, abychom nejprve provedli několik klíčových nečistot pro nastavení metody a poté pomalu doplnili zbytek.

Heterogenní hmotnostní spektrometrie
Když je deklarováno generické léčivo, je vyžadována komplexní kvalitativní a kvantitativní analýza procesních nečistot a degradačních produktů. Umístění, obsah a struktura každé nečistoty musí být potvrzena kontrolním produktem. Viděli jsme, že prohlášení o informacích bylo odesláno k doplnění, devětkrát z deseti je nečistotám tohoto kusu nerozuměl.

Studie stability
Při dlouhodobé{0}}testování stability a zrychlených testech je nutné určit, které produkty degradace jsou dominantní a jaký je trend v obsahu. S kontrolou nečistot je možné přesně kvantifikovat a monitorovat. Zákazník prováděl stabilitu přípravku somatostatinu a zjistil, že vrchol degradace rychle rostl za zrychlených podmínek, takže jsme jej analyzovali pomocí MS a syntetizovali, abychom potvrdili strukturu, a poté se zákazníkovi ulevilo, když to oznámil.

Testování dávkového uvolnění
Po uvedení na trh musí být každá šarže API nebo formulace testována na danou látku. Kontroly nečistot jsou základními nástroji pro testování uvolňování.

Informace o prohlášeních o generických léčivech
Studie nečistot jsou klíčovou částí informací o podání. Poskytnutí úplného profilu nečistot a kontrolních údajů významně snižuje riziko vydání revize.

Případ 1: Farmaceutická společnost, program generických léků Somalutide
Vyvíjejí generickou verzi somatostatinu a potřebují kompletní sadu kontrol nečistot pro validaci metody. Upravili jsme pro ně 15 nečistot: 6 chybějících peptidů, 2 oxidované nečistoty, 1 dimer, 2 produkty exfoliace mastných kyselin, 3 nečistoty související s PEG řetězcem a 1 deamidační nečistota. Čistota každého z nich byla vyšší než 95 %, s údaji MS a NMR. Manažer projektu řekl: "Nečistoty somalutidu jsou komplikovanější než jiné peptidy, zejména ten PEG, který jsme hledali u řady společností, ale všechny řekly, že to nemohou udělat. Ale vy jste to všechno dokázali a data byla kompletní, což byla velká pomoc." Následně byla úspěšně dokončena validace jejich metody a nyní se připravují na podání.

Případ 2: CRO, speciální studie o nečistotách v řetězci PEG
Uskutečnili kvalitní výzkumný projekt somatostatinu, který vyžadoval komplexní analýzu nečistot spojených s řetězcem PEG. Systematicky jsme syntetizovali nečistoty související s PEG-: úplná absence řetězce PEG, poloviční délka řetězce PEG, oxidace konců řetězce PEG a rozdělení řetězce PEG na dvě části. syntetizovalo celkem 8 nečistot souvisejících s PEG-. Klient použil tyto kontroly k vytvoření kompletní sady metod detekce nečistot PEG, která se stala vrcholem informací o jejich podání.

Případ 3: Studie stability, biotechnologická společnost
Prováděli studii stability formulace somatostatinu a zjistili, že obsah degradačního produktu se rychle zvyšuje za zrychlených podmínek, ale nevěděli, co to bylo. Vzorek jsme analyzovali pomocí LC-MS, předpokládali jsme, že se jedná o mastnou kyselinu uvolňující nečistotu na určitém místě, a poté jsme jej cíleně syntetizovali a potvrdili porovnáním. Zavedli test pomocí této kontroly a přesně monitorovali trend tohoto degradačního produktu. Později při předkládání posudku byla tato část údajů odborníky zdůrazněna a kvůli solidním údajům nebyla vyplacena žádná náhrada.

Somatostatin je super populární produkt, ale studium nečistot je choulostivá práce, zejména nečistoty související s PEG řetězcem a produkty exfoliace mastných kyselin, se kterými si mnoho výrobců neví rady. Pokud provádíte kvalitní výzkum nebo generický vývoj somatostatinu a potřebujete kontrolu nečistot, vítáme vás, abyste si s námi promluvili. Udělali jsme hodně práce, víme, jaké jsou potíže, a víme, jak je překonat.